目前以DNA为基础的PCR检测方法,能从活细胞和死细胞中扩增出目的基因,无法有效地区分细胞的死活。例如死细胞或自由状态的DNA已经没有危害性,却仍然被检测出来,导致假阳性结果和较低的准确性。PhASTBlue光活化系统利用EMA的选择渗透性,结合PRC技术,能够有效地检测鉴别细菌的死活细胞,有效地为食源性疾病的预防和控制提供可靠证据,也可有效检测区分植物病原细菌死活细胞。
在PhASTblue之前,使用大功率卤素灯泡的自制解决方案已经被应用到试剂光活化中,这些解决方案在操作中存在一些问题,例如:重现性较低,样品可能过热等。
EMA叠氮溴乙锭(Ethidium Monoazide)-活性PCR必备工具。作为一种光敏感的DNA染料,EMA的作用受光活化过程的光照程度、光照波长、光活化时长及温度等因素影响。配合PhAST系统使用,灵活调整各项光活化参数,轻松获得实验结果。EMA易光解形成氮宾化合物,与DNA分子或其他分子共价结合,从而封闭其复制位点,EMA能进入具有不完整细胞壁或细胞膜的死细胞中,而无法穿透活细胞的细胞膜。多余的EMA与水结合生成羟胺,不影响PCR扩增。
PHASTblue核酸光标记系统可用于疾控系统、质检系统、检验检疫/商检系统、大学/科研院所、环境监测系统、水产检测系统,也可用于光动力药物、光敏剂研究领域。
系统优势
专利技术,小巧便携,操作简单
大功率LED光源,防止样本过热
光学定位,提高试剂与DNA的结合效率
简单高效,可同时进行12个样本的光活化
程序控制,可选择3段特异性波长
减少假阳性结果,提高检测准确率
提高实验可重现性
